충인과학

자료실

GC Column Installation Instructions

작성자 : 충인과학

Date : 2015-07-28 17:10 | Hit : 787

<GC Column Installation Instructions >

다음은 organic-coated fused silica capillary column을 다루는 방법이다. Fused silica capillary column은 제조 되는 동안 적용된 polyimide coating이 잘 깨지기 쉽기 때문에 370℃ 이상은 안되고, 보호 코팅을 손상시킬 우려가 있으므로 구부리거나 비틀거나 자극을 주어서는 안 된다. 이러한 부주의로 인하여 컬럼이 당장에 망가지지 않는다 해도 보호 코팅이 손상되게 되면, 컬럼이 나중에 자연적으로 깨지게 된다.
컬럼에는 septa나 ferrule로부터 발생될 수 있는 debris(파편)이 없어야 하며, 컬럼 내부에 코팅 되어 있는 정지상도 보호되어야 한다. 컬럼을 받으면, septum으로 컬럼의 양 끝을 봉해야 하며, 양 끝을 개봉한 후, 바로 크로마토그램에 설치되어야 한다. 또한 컬럼이 열린 순간부터 재봉합 될 때 까지 건조된 산소 없는 carrier gas를 흘려주어야 한다.

*   Installing the column   *

A.        Instrument and capillary column preparation

1.        모든 heated zone(가열된 부분)을 끄고 열을 식힌다.
2.        carrier gas의 순도가 충분히 좋은지 확인하고, 적합하다면 carrier gas purifier를 놓는다.
3.        깨끗하고 비반응성인 injector와 detector 연결
4.        seal과 septum을 놓고, 필요하다면 deactive liner도 설치
5.        make up 비율을 포함하는 detector를 위한 gas flow rate 설정
6.        컬럼 손상 검사
7.        컬럼 한 쪽 끝을 1~2 cm자른다. tubing을 score 하기 위해 sapphire scriber나 ceramic scoring wafer를 사용한다.
8.        컬럼 끝부분을 아래에 두고, nut와 ferrule을 그 위에 설치한다. Ferrule이 size가 맞고, 바른 방향을 향하는지 체크 한다.
9.        ferrule fragments 제거를 위해 컬럼의 남은 한 끝으로부터 여분의 1 또는 2cm자른다. (20-power magnifying glass가 추천됨) 컬럼의 끝부분이 깨끗하지 않으면, 컬럼을 다시 잘라라.
10.         컬럼 코팅에 손상이 가지 않게 컬럼을 GC oven에 연결, oven의 벽에 닿거나 구부러지면 안 된다.
11.         컬럼 injector 내에 정확히 넣는다. (정확한 거리는 instrument manual 참고) 정확한 insertion distance를 mark 하기 위해 type writer correction fluid를 사용해라.
12.         컬럼이 움직임에 영향을 받지 않을 때까지 ferrule nut를 조여 준다. 이 때 컬럼은 detector에 연결하지 말아라.
13.        test chromatogram에 리스트 된 flow rate를 얻기 위해 head pressure를 적용해라.
14.        누출을 보기 위해 inlet connection 살펴 본다.
15.          acetone과 같은 nontoxic solvent의 한 vial 내에 column outlet을 담그어 bubble을 관찰함으로써 컬럼을 경유하는 gas flow를 확인할 수 있다.

B.        Conditioning & Testing the Capillary column

16.        컬럼을 carrier gas로 약 15분간 purge한다. Conditioning은 그 이상 해주어도 좋다.
17.        컬럼 끝 outlet을 매뉴얼에서 기술하는 거리대로 detector에 정확히 삽입한다. 7~9 단계를 되풀이 하여 정확한 삽입 거리를 마크하기 위해 typewriter correction fluid를 사용한다.
18.        instrument specifications에 gas flow rate를 설정.
(주의 :  gas flow를 적당히 해주지 않으면, 가열에 의해 detector가 손상될 수 있다.)
19.        system에 leak가 없는지 체크 한다. Thermal-conductivity-type leak detector를 사용하면 좋다. 비누나 liquid-based leak detector를 캐필러리 컬럼에 사용하지 말아라. Leak를 확인하기 전까진 컬럼에 열을 가하지 마라.
20.        injector와 detector 온도를 setting 한다. 온도가 일정해지면 detector를 켠다.
21.        컬럼의 최대 작동온도까지 oven의 온도를 높인다.
(주의 :  컬럼의 제한온도를 넘으면 안 된다.
Baseline이 평평해질 때까지 온도를 유지한다. 이 작업이 반시간 이상 걸리면, 문제가 있을 수 있다.)
22.        dead volume time과 linear gas velocity를 결정하기 위해 methane과 같은 감지 가능한 nuretained sample을 주입한다. Gas 압력은 분석법에 적합한 값을 얻을 구 있도록 조정한다.
23.        oven을 시작 온도에 맞춘다. 다른 detectable unretained substant를 주입한다. Carrier gas velocity가 바른 값이 나오도록 reset 한다.
24.        알려진 샘플의 주입이나 performance test mix를 통하여 GC와 컬럼의 performance를 체크 한다.
25.        instrument를 calibrate한다.
26.        샘플을 주입한다. Vaporized sample volume이 inlet sleeve’s buffer volume을 초과해서는 안 된다.
27.        GC instrument의 단기간 작동을 위해, carrier gas flow를 100~200℃로 유지한다. Long term standby condition은 컬럼을 기기에서 제거하고, flame-sealed나 septa로 end-capped 하고, 원래 제품 박스에서 빛이 없는 곳에 보관해야 한다.